精液質(zhì)量分析是評價男性生育能力的重要依據(jù),也是臨床男性不育癥診斷和治療的重要檢測項目。影響男性不育的因素很多,但大部分與精子的數(shù)目、形態(tài)及運(yùn)動功能改變有關(guān)[1].以前評價男性生育力的實(shí)驗室參數(shù)主要依據(jù)精液常規(guī)檢查(包括精子存活率、精子活力、精子密度等),然而常規(guī)精液檢查對精子運(yùn)動的評估只是采用主觀目測,無法測定精子的微細(xì)運(yùn)動特點(diǎn),在臨床衡量男性生育力方面提供的信息有限,影響男性不育的診斷和治療。計算機(jī)輔助精液分析(CASA)系統(tǒng)不僅能夠準(zhǔn)確地測定精液常規(guī)指標(biāo),還可快速分析多項精子動態(tài)參數(shù)[包括曲線速度(VCL)、直線速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)、平均移動角度(MAD)、側(cè)擺幅度(ALH)、鞭打頻率(BCF)、直線性(LIN)、擺動性(WOB)、前向性(STR)等],為精子的微細(xì)運(yùn)動提供了量化結(jié)果[2].因此,本研究采用該系統(tǒng)對本院2343例男科門診患者精液進(jìn)行了常規(guī)指標(biāo)和精子動態(tài)參數(shù)分析,現(xiàn)報告如下。
目的:探討精子動態(tài)參數(shù)在評價男性生育能力方面的應(yīng)用價值。方法:嚴(yán)格按照WHO技術(shù)規(guī)范,用計算機(jī)輔助精液分析(CASA)系統(tǒng)對本院2343例男科門診就診的患者精液進(jìn)行常規(guī)指標(biāo)和精子動態(tài)參數(shù)分析。結(jié)果:①正常精液組和異常精液組各項精子動態(tài)參數(shù)比較,均存在統(tǒng)計學(xué)差異;②隨著精子存活率的下降,曲線速度(VCL)、直線速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)、平均移動角度(MAD)、側(cè)擺幅度(ALH)、前向性(STR)下降明顯,鞭打頻率(BCF)呈上升趨勢,而直線性(LIN)、擺動性(WOB)差異無顯著性;③與密度活力正常組比較:少精組除LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,差別有統(tǒng)計學(xué)意義外,其余五項參數(shù)差別無統(tǒng)計學(xué)意義;弱精組除MAD無統(tǒng)計學(xué)差異外,其余八項參數(shù)均有統(tǒng)計學(xué)差異;少弱精組除MAD和ALH無統(tǒng)計學(xué)差異外,其余七項參數(shù)均有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:精子動態(tài)參數(shù)是評估精液質(zhì)量的重要指標(biāo),為男性不育的診斷、治療和研究提供了充分的依據(jù)。
1 材料與方法1.1 研究對象 選取2006年7月~2007年8月本院男科門診就診的患者2343例(排除無精子、死精子病例,因其動態(tài)參數(shù)為0),年齡18~52歲,平均年齡(29.5±4.4)歲。
1.2 檢測儀器 WLSY?9000偉力精子彩色分析系統(tǒng)(北京偉力技貿(mào)公司提供)。
1.3 檢測方法 所有研究對象均嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,在標(biāo)本采集前禁欲3~7d(包括無遺精或手淫,具體標(biāo)準(zhǔn)是:25歲以下禁欲3d,25~35歲禁欲5d,35歲以上禁欲7d)。通過手淫法留取全部精液標(biāo)本于潔凈干燥的一次性采精杯中(取不完全者囑其重?。喝〕龊筝p輕混勻,靜置35~37℃的恒溫水浴箱中,觀察其液化情況。待精液完全液化(對1h未液化或液化不完全者也在1h內(nèi)進(jìn)行檢查[3])后充分混勻,進(jìn)行計算機(jī)輔助精液分析,嚴(yán)格按照儀器操作說明,取精液于37℃預(yù)熱的精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)計數(shù)板上,保溫2min后開始檢測。每份標(biāo)本隨機(jī)采樣至少200個精子以上,對于嚴(yán)重少精子者,至少采集20個視野,獲得精子存活率、精子活力、精子密度及精子動態(tài)參數(shù)等定量結(jié)果,每份標(biāo)本均在3~5min內(nèi)完成上述項目的檢測。
1.4 精液質(zhì)量判定標(biāo)準(zhǔn)及分組 ①按《WHO人類精液及精子?宮頸黏液相互作用實(shí)驗室檢驗手冊》[3]規(guī)定的正常精液標(biāo)準(zhǔn)(即精子密度≥20×106/mL;精子存活率≥50%;精子活力:a級≥25%或a+b級≥50%,分為正常精液組(完全符合WHO規(guī)定的正常精液標(biāo)準(zhǔn))和異常精液組(有一項或以上不符合WHO規(guī)定的正常精液標(biāo)準(zhǔn))。②按不同精子存活率分為三組,其標(biāo)準(zhǔn)分別為精子存活率>80%;50%≤精子存活率≤80%;精子存活率<50%.③按不同精子密度和活力分為:精子密度活力正常組(即精子密度≥20×106/mL,a級精子≥25%或a+b級精子≥50%);少精組(即精子密度<20×106/mL,a級精子≥25%或a+b級精子≥50%);弱精組(精子密度≥20×106/mL,a+b級精子<50%且a級精子<25%);少弱精組(精子密度<20×106/mL,a+b級精子<50%且a級精子<25%)。
1.5 數(shù)據(jù)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。兩組數(shù)據(jù)比較采用成組t檢驗,多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析和Dunnett?t檢驗,P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié) 果2.1 正常精液組和異常精液組精子動態(tài)參數(shù)比較 兩組間各項參數(shù)比較均存在統(tǒng)計學(xué)差異(表1)。
2.2 不同精子存活率精液間動態(tài)參數(shù)比較 隨著精子存活率的下降,VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、STR下降明顯;BCF呈上升趨勢;而LIN、WOB差別無顯著性(表2)。
2.3 不同精子密度活力的精液間動態(tài)參數(shù)比較 四組精液間各項動態(tài)參數(shù)指標(biāo)經(jīng)方差分析顯示各個總體均數(shù)不相等或不全相等,經(jīng)Dunnett?t檢驗后發(fā)現(xiàn):①少精組與密度活力正常組比較LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,差別有統(tǒng)計學(xué)意義,其余五項參數(shù)比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義;②弱精組與密度活力正常組比較,除MAD差別無統(tǒng)計學(xué)意義外,其余八項參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;③少弱精組與密度活力正常組比較,除MAD和ALH無統(tǒng)計學(xué)差異外,其余七項參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(表3)。表1 正常精液組和異常精液組的精子動態(tài)參數(shù)比較 表2 不同精子存活率精液間動態(tài)參數(shù)比較表3 不同精子密度和活力精液間動態(tài)參數(shù)比較3 討 論正常的受孕過程需要精子特征性的微細(xì)運(yùn)動以穿透卵丘和透明帶,精子的快速、直線、前向運(yùn)動是提高受孕幾率的保證。傳統(tǒng)的常規(guī)精液檢查無法測定精子微細(xì)運(yùn)動,在評價男性生育力方面存在一定的局限性,而精子的動態(tài)參數(shù)客觀地反映了精子微細(xì)運(yùn)動特點(diǎn),并與受精率顯著相關(guān)[4].本研究通過CASA分析系統(tǒng)為精子的微細(xì)運(yùn)動提供了量化結(jié)果,進(jìn)一步為男性生育能力評價提供客觀依據(jù)。
動態(tài)參數(shù)VCL、VSL、VAP反映了精子的運(yùn)動速度,與精子的活力密切相關(guān)[5];LIN、WOB、MAD、ALH和STR等參數(shù)反映了精子運(yùn)動的直線性和前向性。精子運(yùn)動直線性和運(yùn)動速度的降低將會導(dǎo)致受孕的幾率大大降低。本研究發(fā)現(xiàn),精液質(zhì)量異常組的VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、WOB、LIN和STR均明顯低于正常組,說明該組患者的精子在運(yùn)動方面存在缺陷,即精子運(yùn)動的線性、速度、前向等特性都有異于正常精子。上述精子運(yùn)動缺陷,可能正是導(dǎo)致男性生育能力低下的原因。
在不同精子存活率精液間動態(tài)參數(shù)分析中,隨著精子存活率的下降,VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、STR明顯下降,提示快速向前運(yùn)動的精子數(shù)目減少、精子運(yùn)動能力有下降趨勢;BCF呈上升趨勢則說明原地打轉(zhuǎn)的精子數(shù)目增加。這些指標(biāo)充分反映了不同存活率精液中精子微細(xì)運(yùn)動特性存在顯著性差異,再一次論證了精子動態(tài)參數(shù)對于男性生育能力評價的重要性。
在不同精子密度活力的精液間動態(tài)參數(shù)分析中,我們發(fā)現(xiàn)少精組的LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,可以看出密度少的精液在精子活力正常時精子的直線向前運(yùn)動相對較快,可能是因為在一定的空間內(nèi),由于精子數(shù)目減少使精子在運(yùn)動時所受的空間阻礙變小,從而使其運(yùn)動加快。這提示精液常規(guī)檢查密度低于正常者其妻仍有可能懷孕,我們在評價男性的生育能力時,應(yīng)綜合考慮。同時,弱精組LIN、STR和ALH,少弱精組STR、LIN均低于密度活力正常組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),少弱精組的ALH略低于密度活力正常組, 但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),這提示兩組精子運(yùn)動的直線性有所降低。此外,弱精組和少弱精組的VSL、VCL、VAP三項精子動態(tài)指標(biāo)均呈顯著性降低,與密度活力正常組比較均有顯著性差異(P<0.01),提示兩組精子的運(yùn)動速度比較緩慢,精子很難通過女性生殖道到達(dá)受精部位,從而可能導(dǎo)致不孕或不育。
可見,將精子動態(tài)參數(shù)分析與精液常規(guī)指標(biāo)檢查相結(jié)合,可以更準(zhǔn)確、更客觀地了解精液質(zhì)量的真實(shí)情況,正確評價男性生育能力,為男性不育的診斷、治療和研究提供更充分的依據(jù)。但由于人類精液質(zhì)量受各種因素的影響變化較大,WHO在男性不育癥患者檢測診斷指南[6]中亦明確規(guī)定:“首次精液檢查合格者,可以認(rèn)為他們的精液質(zhì)量是正常的,而首次檢查不合格者,必須重復(fù)檢查精液。”因此在評價個體生育能力時,仍應(yīng)綜合分析各種可能性后再作出判斷。
參考來源:《2343例男科就診患者精子動態(tài)參數(shù)分析》余玲玲,陳小劍,江明華,丁琴麗,楊海蔚,《現(xiàn)代泌尿外科雜志》2008年第12卷第6期